操作步骤
1消化操作:详细步骤见消化装置说明书。
2蒸馏:
2.1蒸馏前准备
安装仪器,具体步骤如下所示
将进水管的一头拧到冷凝水进水口,另外一头拧到自来水龙头上。出水口和排水阀分别用黑色胶管连接,另一头放入下水道即可。
接通电源。电源线内必须有良好的接地线,同时必须保持与仪器相通。不可将零线当接地线。
注意:溶液桶桶口放置位置需低于仪器工作台台面,务必将溶液桶放置在地上。
1.两根溶液管端头已安装好管内过滤器,插入溶液桶之前先检查下过滤器有无脏物,无脏物再插入溶液桶使用。
2.再将溶液管放入相对应的溶液容器中即可。
2.2 蒸馏操作
a.打开水龙头,使自来水进入冷凝管进水口胶管。(注意水流量以保证冷凝管起到冷却作用为止)
b.开总电源开关,待红色水位指示灯(3)亮,按一下蒸汽按钮(10)待蒸汽导出管(7)放出蒸汽,再按蒸汽按钮(10)停止加热。
c.在蒸馏接收管托架上,放上已经加入适量(15ml左右)的接收液(硼酸和混合指示剂)的锥形瓶,使蒸馏接收管的末端浸入接收液内。
d.在消化完全冷却后的消化管内,逐个加10ml左右蒸馏水稀释样品,如微量蒸馏,需将冷却后的消化液移至定容瓶内定容,然后按需移液至消化管内。
e.向下压左侧手柄(8),将消化管套在防溅管密封圈(5)上,稍加旋转使其保持接口密封,拉下防护罩。
f.加碱:按一下加碱按钮(1),NaOH溶液量必须至蒸馏液颜色变棕褐色为止。碱液量调节,时间为秒,调节方法,先按设置按钮(11),再按加碱按钮(1),待加碱时间显示窗(9)数字闪烁,设定所需时间。从1秒至40秒循环,按所需量调节后在加碱时按下加碱按钮(1)即可。(注意:如仪器连续数天停止使用,必须先吸空胶管和碱泵内的碱液,然后用10%的硼酸溶液过滤胶管和碱泵,再用蒸馏水过滤一次即可)
g.按一下蒸汽按钮(10),节水阀自动开启,自来水进入冷凝管循环管路,开始蒸馏,到时报警。用洗瓶冲洗接收管(此时要脱离锥形瓶,防止倒吸),继续蒸馏1分钟后自动停止,取下锥形瓶。(全量蒸馏接收液体积约为150ml;微量蒸馏接收液体积约为100ml)。(接收液量调节,时间为分,调节方法:先按设置按钮(11),再按蒸汽按钮(10),待蒸汽时间显示窗(9)数字闪烁,设定所需时间从1分至20分,按所需量调节后在蒸馏时只要按一下即可)。
3 滴定:
取下锥形瓶,用标定后的盐酸溶液进行滴定,溶液由蓝绿色变为灰紫色为终点。
4 空白测定:
用0.1g糖代替样品或不加样品作空白测定。
5 测定结果计算:
5.1 测定计算公式:
粗蛋白质%= |
(V2-V1)×C×0.0140×K |
×100 |
W×V′÷V |
式中:V2 —滴定试样时消耗酸标准溶液的体积(ml)
V1 —滴定空白时消耗酸标准溶液的体积(ml)
V —试样分解液总体积(ml)
V′—试样分解液蒸馏用体积(ml)
C —酸标准溶液的mol/L浓度
K —氮换算成粗蛋白质的系数
W —试样重量(g)
0.0140—氮的毫克当量数
5.2 平行测定的结果用算术平均值表示,保留小数点后二位。
5.3 结果报告中必须注明氮换算成粗蛋白质的系数。