粗脂肪含量是粮食、油料、饲料等产品标准中重要的质量 指标, 是评价产品品质和组织生产的重要依据之一。国内外测 定粗脂肪含量的方法有 10 余种之多, 索氏抽提法是目前应用 最广泛的测定方法, 是公认的脂肪含量测定的经典方法 。在实 际工作中, 此法存在的问题主要是抽提时间过长和抽提结束后 抽提瓶不易恒重。围绕这些问题, 对抽提过程和抽提前后采用 的处理手段进行改进。以国标法为参照, 热浸提-油重法和残 余法为改进方法, 对照比较这 3 种检测方法的测定结果。 

1　原理 

经典索氏提取法测定脂肪是将样品放在抽提筒内以水浴 蒸馏冷凝的乙醚进行回流浸提, 一般要十几个小时。热浸提 油重法由于样品处于高温溶剂中, 分子运动加快, 使脂肪的浸 出速度加快, 大大缩短了浸提时间, 从而加快了测定速度。 一 般完成样品的整个提取过程不到 2 h。铝杯代替玻璃瓶, 电热 板代替水浴加热, 抽提杯容易称恒重, 而且抽提杯不易被污染,操作简单。残余法采用抽提过脂肪的残余物的质量计算脂肪 含量。较以前的残渣法的改进之处在于不需称恒重纸袋质量, 在电子天平上称出试样质量, 抽提前后样品的质量差为浸出脂 肪的量。测得的结果为原样脂肪含量, 不是干基脂肪含量, 与 国标法测得的结果一致。 

2　检测方法 

2. 1　试剂和仪器 分析纯的无水乙醚或沸程为 30～ 60 的石油醚; 索氏脂肪 提取器; FOSS 2055 型脂肪测定仪, 电子天平。 

2. 2　式样制备 选取具有代表性的样品 200g, 粉碎后全部通过 60 目筛, 装于密封容器中, 防止试样成分发生变化。 

2. 3　分析步骤 

2. 3. 1　国标法 　按 GB/T 5512 食品中脂肪的测定方法或 GB/T 6433 饲料粗脂肪测定方法进行检测。 为使抽提终点有 一量化的概念, 消除不同人员目测产生的差异, 同时避免检查 抽提终点时乙醚大量挥发而损害检验人员健康 。采取平行测 定 6 个样品, 8 h 后取出 1 个抽提瓶, 以后每隔 2 h 取出 1 个,直到样品脂肪含量不再增加为止。 测出不同类别的样品需要 的抽提时间, 可作为日常工作的参照, 也是改进法确定实验条 件的依据之一。部分样品测定脂肪需要的抽提时间见表 1。 

2. 3. 2　热浸提-油重法　称样 1～ 5 g( M)于滤纸筒中, 烘干。 把滤纸筒放到脂肪测定仪中。铝杯在( 105±2) ℃条件下恒重 ( M1) 。放到仪器加热板上, 压下仪器连接手柄, 使铝杯与回流 器紧密连接。从加液孔加入乙醚 80 mL, 接通冷凝水。脂肪含 量设定仪器条件: 加热温度 135℃; 浸提时间 30～ 90 min, 淋洗 30 min, 试剂回收 10 min, 蒸干 5 min。取下铝杯, ( 105±2) ℃ 烘箱中干燥30 min, 在干燥器中冷却, 称重( M2) 。脂肪含量= ( M1- M2) ×100/M 2. 3. 3　残渣法　称取式样 2 g( M)( 准确至0. 000 2 g), 用滤纸 包好, (105±2) ℃烘箱中干燥 3 h 取出, 在干燥器中冷却, 称重 ( M1) 。将样包装入索氏脂肪抽提器的抽提筒中, 再倒入无水 乙醚, 乙醚高度为完全浸泡样包, 连接好仪器各部分, 浸泡至少 16 h。将浸泡后的无水乙醚放入抽提瓶中, 在抽提瓶中放入几 粒玻璃球, 然后, 抽提筒中重新倒入无水乙醚, 使之完全浸泡样 包, 连接好仪器各部分, 接通冷凝水, 在 60～ 75 ℃的水浴上加 热, 使乙醚回流, 控制乙醚回流次数为每小时 8 次。一般抽提 6～ 8 h。抽提完毕, 取出样包, 置样包于通风处, 使乙醚挥发。 将样包放入(105±2) ℃烘箱中干燥 2 h, 取出, 在干燥器中冷 却, 称重(M2) 。脂肪含量=( M1- M2) ×100/M 

3　结果与分析 

3. 1　样品脂肪含量 样品选取脂肪含量高的花生、脂肪指标含量中等的鱼粉, 和脂肪含量较低的玉米, 采用热浸提-油重法和残渣法分别测 定, 结果见表 2。由表 2 中数据可以看出, 2 种测定方法的重现 性都比较好。

3. 2　不同方法测定的样品脂肪含量 选取一组样品, 分别用 3 种方法测定样品脂肪含量, 取 5 次测定结果的平均值为最终结果, 进行比较, 数据见表 3。 两 种测定结果与国标法相比无显著性差异( P>0. 05) 。 

3. 3　热浸提法和残余法与其他实验室测定结果的比较 为确定 2 种检测方法的有效性和可比性, 与其他实验室测 定结果进行了比较, 结果见表 4。绝对差均小于 0. 5%, 相对偏 差最高为 3. 6%, 符合标准 GB/T 6433-1994 和 GB/T 551285 不同实验室间重复性要求。

4　结论 　　国标法、热浸提-油重法和残余法均具有好的重现性和准 确度, 说明 2 种改进方法测定结果准确、可靠, 一定条件下 3 种 方法可以相互代替使用。 　　

热浸提-油重法的优势在于, 利用脂肪测定仪使试样浸入 沸腾的溶剂, 使脂肪迅速进入溶剂中。样品不同只需改变浸提 时间, 淋洗时间的改变没有浸提时间的改变影响大。 30 min 的淋洗时间足以使脂肪完全洗脱。 　　

残余法浸泡可利用晚上时间, 不加热回流, 不必守护, 不占 用工作日。回流时间可参照表 1 进行调整 。方便面等油炸食 品中外加的脂肪, 虽然含量高, 但容易浸出, 浸泡后回流 2～ 3 h 方可提取完全。 　　

实验过程中应注意称量的重要性, 天平室的环境条件除满 足一般要求外, 相对湿度应控制在 45%以下。在此条件下用 滤纸包烘 2 h 过程, 即达到恒重要求, 不必复烘。铝杯在整个 抽提过程中一直处于 135℃的环境中, 只需烘 30 min 即达到恒 重要求。与国标法相比, 节约了恒重所需的大量时间, 简化了 实验操作步骤。 　　

脂肪测定仪可同时测定 6 个试样, 在 1个工作日内可完成 检测, 实现脂肪快速、准确的测定, 能满足日常生产和商贸交易 中关于脂肪含量测定的要求。残余法在 1 套提取器内可同时 放置多个滤纸包, 同时测定多个样品, 显著提高了工作效率, 节 省了水、电和试剂。残余法在大批量的样品脂肪检测中更能显 现其优越性, 如粮食、油料品种的筛选, 市场商品质量的普查等 工作中脂肪含量的测定。 　　

国标法尽管费时间, 仍是普遍使用的方法。3 种方法相互 验证, 起到日常检测质量的控制作用。 脂肪检验要求认真细 致, 一旦忽视了某一个细节, 都会造成实验失败。