索氏抽提法适用范围较广，可用于肉制品、豆制 品、谷物、坚果、油炸果品、中西式糕点等样品中粗脂 肪含量的测定。我们采用此法，在2005年3月参加了由 国家实验室认可委员会（CNAL）组织的能力验证考 核，按《CNAL T0186大豆中营养成分检测能力验证方 案》的要求（以下简称《验证方案》），对国家标准物 质研究中心发放的考核样品进行分析测定工作。经仔细 试验和研究索氏抽提法的全过程，针对有可能影响最终 检测结果准确度和重复性的问题，我们采取一些改进技 术措施，完善实验操作，取得较好的效果。

1 索氏抽提法分析中存在的不明确之处

因《验证方案》对考核样品的测定结果准确度有很 高要求，我们进行了慎重的预实验。在实验过程中发 现，索氏抽提法中有多处列出的分析步骤，没有规定具 体操作方式或相关参数，甚至有不妥之处（下文在括弧 内注明存在的问题），实际操作中难于把握具体细节， 有一定的随意性，对检测结果有较大影响。 1.1 试样处理 准确称取样品2.00～5.00g，必要时（未注明何种情 况为必要）拌以海砂，全部移入滤纸筒内（未注明制作 滤纸筒的具体要求和尺寸，应该多大为适用）。 1.2 抽提取 将滤纸筒放入脂肪抽提器的抽提筒内，连接已干燥 至恒重的接收瓶，由抽取器冷凝管上端加入（此操作法 不妥）无水乙醚或石油醚至瓶内容积的2/3处，于水浴

上加热（导热方式不妥及未注明加热温度），使乙醚或 石油醚不断回流提取，回流速度为6～8次/h，一般需抽 提6h～12h。 1.3 称量测定 取下接收瓶，回收乙醚或石油醚，待接收瓶内乙醚 剩1～2ml时在水浴上蒸干（仍为导热方式不妥及未注明 加热温度），再于100±5℃干燥2h。放置于干燥器内冷 却0.5h后称量。重复以上操作直至恒重。

2 实验技术研究及改进

2.1 加入海砂的量与方法 加入海砂的目的是使样品保持膨松状，在抽提时不 结块，使乙醚能够顺畅进入样品内部与其充分接触，提 高回流抽提量，并易于进行下一步往滤纸筒转移的操 作，适用对象为粉末状样品。本次大豆粉考核样研磨得 较细，必须加入适量海砂混匀，保证转移和抽提完全， 否则会出现测定结果偏低的可能性。经试验加入量以与 样品体积比例1：1为宜，可使大豆粉样品疏松通透，操 作要点为加入时应充分搅拌均匀。

 2.2 滤纸筒的制作 滤纸筒制作尺寸主要考虑以下几个因素：（1）滤 纸不宜过小。折叠成筒状时重叠部分较少，抽提时样品 容易从接头处漏失。（2）滤纸不宜过大。折叠成滤纸 筒时会使重叠部分过多过厚，阻碍抽提液顺畅流经样 品，降低抽提效率。（3）特别要注意与实验器皿尺寸 相匹配。滤纸筒的直径应与抽提瓶内径一致，偏大则不易将滤纸筒放入抽提瓶，硬性推入可能造成滤纸筒破裂。 偏小则会使滤纸筒漂浮于抽提液中，随抽提液升降，滤纸 筒浮于液面之上的部分，抽提效果将受影响。因此，我们 选择Φ18cm定量滤纸制作滤纸筒，将下端向上折叠2cm。 既保证抽滤时速度适中样品不损失，又使滤纸折叠成筒状 时有足够适宜的重叠部分，不会使样品从接缝处漏出或者 阻碍抽提液渗透流通。操作时必须注意：样品在倒入时不 得进入重叠部分的外层。滤纸筒放入抽提瓶底，用洁净玻 璃棒或吸管将滤纸筒上端轻轻压下成封闭状，但要注意不 要压得太紧，高度与回流管（细管下沿）齐平。 

2.3 抽提剂乙醚的加入方法 本次实验采用无水乙醚为抽提剂，加入无水乙醚 时，不能按1.2的方法直接从冷凝器上端加入。这样操作 加入的乙醚向下流淌速度太快，将顺冷凝管直接冲滴到 滤纸筒上，会使样品从滤纸筒中渗出，抽提瓶中出现混 浊。我们对此作了改进，具体的做法是将乙醚直接倒入 接收瓶内至2/3处，避免了抽提剂直接冲击包有样品的 滤纸筒，从而减少样品损失。 

2.4 水浴加热的导热方式及加热温度 我们通过对实验全过程的观察分析，认为采用常规 的水浴加热方式是不妥当的。原因为：该方法的最终测定 手段是对接收瓶恒重，称量其增重（即样品重量），精确 至万分之一克。因此除样品本身外，其它能使接收瓶改变 重量的因素均应排除。而将接收瓶直接浸入恒温热水中， 难于避免水中杂质结附于瓶底（如水垢等），特别是类似 本次实验这样加热时间长的情况就更加严重。因此，我们 采用降低水浴锅中的水位，将接收瓶架于水浴锅垫圈上的 办法，改为以蒸气为热媒介质进行加热，确保接收瓶底不 接触加热水。为满足乙醚不断回流抽提（6～8次/h）的要 求，经多次试验，水浴温度控制在75～80℃为宜。 

2.5 其它注意事项 （1）对于检测质量要求高的样品，正式开始测定前 应做好预实验，初步了解样品中脂肪含量的范围，估算适 合的取样量，取样量不宜太少，否则测定精密度较差。 （2）接收瓶中最终结果呈现的应该是澄清透明的油 状物，若是出现混浊状或有少量沉淀物，都表明样品有渗 漏现象。如果发生这种情况，必须重新进行样品的检测。 （3）回流时间以有冷凝后的乙醚滴下开始记时， 全程共7.0h。 （4）恒重接收瓶、样品时，控制干燥箱的温度为 100±3℃，2h，在干燥器中冷却0.5h后称重。特别强调 每次称量的时间间隔要控制准确一致。（5）注意天平室的温度、湿度在各次称量时应基 本保持一致，便于称量达到恒重结果。 （6）在整个实验操作过程中，应配戴一次性PVC 手套，避免手对接收瓶外壁的沾污，造成结果偏重，形 成正误差。 （7）有条件时应带质控样同时分析，检验实验的 系统误差，保证测定准确度。

3 考核样检测结果

按《验证方案》对考核样品的测定要求，采用以上 改进完善后的方法，测定CNAL T0186大豆考核样中脂 肪含量，测定5个平行样取平均值。数据准确度高(︱Z︳ ≤ 2 )，精密度好（A样：RSD＝3.64%；B样：RSD＝ 0.78%），获得了满意的结果。实验测定结果见表1

检测完成后，及时整理了实验数据，按时将全部资 料上报。根据国家实验室认可委员会（CNAL）反馈的 考核评审结论，本次对考核样检测的数据准确可靠，取 得满意结果(见表2)。

4 结论

采用前述经改进的实验技术，可以很好地完善索氏 抽提法，使实验过程更为科学合理，从而获得高质量的 检测结果。