粗脂肪含量是粮食 、 油料、 饲料等产品标准中重要质量 指标 , 是评价产品品质 , 组织生产的重要依据之一。 国内外 测定粗脂肪含量方法有十余种之多 , 索氏抽提法是自前应用 最广泛测定方法 , 是公认的脂肪含量测定的经典方法。 在实 际工作中, 此法存在的问题主要是抽提时间过长和抽提结束 后抽提瓶不易恒重。 围绕这些问题 , 对抽提过程和抽提前后 采用的处理手段进行改进 , 以国标方法为参照 , 热浸提一油 重法和残余法为改进方法 , 对照 比较这三种检测方法的测定 结果。 1 方法原理 经典索氏提取法测定脂肪是将样品放在抽提筒内 , 以 水浴蒸馏冷凝的乙醚进行回流浸提 , 一般要十几小时。 热 浸提一油重法 由于样品处于高温溶剂中 , 分子运 动加快 , 使 脂肪浸出速度加快 , 因而大大地缩短浸提时间 , 从而加快测 定速度 , 一般完成样品的整个提取过程不到 2 小时。 铝杯 代替玻璃瓶 , 电热板代替水浴加热, 抽提杯容易恒重 , 而且 抽提杯不易被污染 , 操作简单容易。 残余法不 同之处在于 采用抽 提过脂肪的残余物质量计算脂肪含量 , 较以前的残 渣法改进之处在于不需恒重纸袋质量 , 在电子天 平上称出 试样质量 , 抽提前后 样品质量差为浸 出脂肪量。 测得结果 为原 样脂肪含量 , 不是干基脂肪含量 , 与国标法测得结果 一 致。

2 检测方法 .2 1 试剂 分析纯无水乙醚或沸程为 3 0 ` 6 0 石油醚。

2.2 仪器 索氏脂肪提取器 ; F 0 s S 2 05 5 型脂肪测定仪 ; 电子天平

2.3 式样制备 选取具有代表性样品 20 0 9, 粉碎后全部通过 6 0 目筛 , 装于密封容器中 , 防止试样成分变化。

2.4 分析步骤

2 .4 1 国标法 按 G B / T 5 5 1 2 食品中脂肪测定方法或 G B / T 643 3 饲料

粗脂肪测定方法进行检测。 为使抽提终点有一量化概念 , 消 除不同人员目测产生差异 , 同时避免检查抽提终点时乙醚大 量挥发损害检验人员健康。 采取同时平行测定 6 个样品 8 小时后取出一个抽提瓶 , 以后每隔2 小时取出一个 , 直到样 品脂肪含量不再增加为止。 测出不同类别样品需要的抽提 时间 , 可作为日常工作参照 , 也是改进法实验条件确定依据 之一。 部分样品测定脂肪需要的抽提时间见表 1。

2 .4 2 热浸提一油 重法 称样 l 一 5 9 (M ) 于滤纸筒中 ,烘干 , 把滤纸筒放到脂肪测 定仪中。 铝杯在 10 5 ℃士 2℃条件下恒重 (M )I , 放到仪器加热 板上 , 压下仪器连接手柄, 使铝杯与回流器紧密连接 , 从加液孔加入 乙醚 8 0 m l, 接通冷凝水。 视脂肪含量设定仪器条件为: 加 热温 度 1 3 5℃ , 时 间: 浸提 3 0 面n 一 9 0 m in , 淋 洗

3 0 im n , 试剂回收 1 0 m i n , 蒸干 5 m io n 取下铝杯 , 1 0 5℃士 2℃ 烘箱中干燥 3 0 而n , 在干燥器中冷却 , 称重 (M o z ) 脂肪含量 =( M2 一 M ,) X 100 /M. 2 .4 3 残渣法 称 取式样 2 9 (M ) (准 确至·. 0 0 00 2 9 ), 用 滤纸 包好 ,1 0 5℃ 士 2℃烘箱中干燥 3 h 取出 , 在干燥器中冷却 , 称重(M ) I。 将样包装入索氏脂肪抽提器抽提筒中 , 再倒入无水乙 醚 , 乙醚高度为完全浸泡样包 , 连接好仪器各部分 , 浸泡至少1 6 h。 将浸泡后无水乙醚放入抽提瓶中 , 在抽提瓶中放入儿 粒玻璃球 , 然后 , 抽提筒 中重新倒入无水乙醚使之完全浸泡样 包 , 连接好仪器各部分 , 接通冷凝水 , 在 6 0 ℃ 一 7 5 ℃ 水浴上加 热, 使乙醚回流, 控制乙醚回流次数为每小时 8 次。 一般抽提 6 h 一s h。 抽提完毕 , 取出样包 , 置样包于通风处使乙醚挥 发。 将样包放入 10 5 ℃士 2℃ 烘箱中干燥 Z h , 取 出, 在干燥器 中冷却 , 称重 (M Z)。 脂肪含量 = (M l一 M匀X l oo / M 3 结果分析

1 ) 样品选取脂肪含量 高的花生、 脂肪含量中等的鱼粉 和脂肪含量较低的玉米 , 采用热浸提一油重法和残渣法分别 测定 , 结果重 复性见表 2。 从表 2 数据看出 , 两种测定方法 重现性都较好。

2 ) 选取一组样品分别用三种方法测定样品脂肪含量 , 取 5 次测定结果平均值为最终结果进行比较 , 数据见表 o 3 两种测定结果与国标法相比, 无显著性差异 (P > . 0 0 5 ) 。

(3 ) 为确定两种检测方法的有效性和可比性 , 与其它实 验室测定结果进行比较 , 结果见表 4 o 绝对差均小于 .0 5% , 相对偏 差 最高为 3 . 6% , 符合标准 G B / T 6 4 3 3 一 19 9 4 、 G B / T55 1 2 8 5 不同实验室 间重复性要求。

4 结论

( 1 ) 国标法、 热浸提一油重法和残余法均具有良好重现 性和准确度 , 说明两种改进方法测定结果准确可靠 , 一 定条 件下 三种方法可以相互代替使用。

( 2 ) 热浸提一油重法优势在于利用脂肪测定仪使试样 浸入沸腾的溶剂中 , 使脂肪迅速进入溶剂中。 所以样品不 同

只 需改变浸提时间 , 淋洗时间改变没有浸提时间改变影响 大。 3 0 m i n 淋洗时间足以使脂肪完全洗脱。

( 3 ) 残余法浸泡时间可 利用 晚上 时间, 由于不 加热 回 流 , 不必守护 , 不占用工作日。 回流时间可参照表 1 进行调

整。 外加的脂肪如方便面等油炸食品 , 虽 含量高 , 但脂肪容 易浸出 , 浸泡后回流 2 一3 小时即可提取完全。

( 4 ) 实验过程中应注意称量 的重要性 , 天平室环境条件 除满足一 般要求外 , 相对湿度应控制 在 4 5 % 以下。 在此条 件下滤纸包烘 2 小时即达到恒重要求 , 不必复烘。 铝杯在整个抽提过程一 直处于 13 5 ℃环境中 , 只需烘 3 0 m i n 即达到 恒重要求。 与国际法相比 , 节约恒重所需大量时 间, 简化实 验操作 。

(5 ) 脂肪测定仪 同时可测定 6 个试样 , 在 1 个工作 日内 可 完成检测 , 实现脂肪快速、 准确测定。 能满足 日常生产和 商贸交易 中对脂肪含量测定要求。 残余法在一 套提取器 内 可 同时放置多个滤纸包 , 同时测定多个样品 , 显著提高工作 效率 , 节省水、 电和试剂。 残余法对大批量样品脂肪检测更 能显现其优越性 , 如粮食、 油料品种筛选 , 市场商品质量普查 等工作中脂肪含量测定。

( 6 ) 国标法尽管费时间 , 但仍是普遍使用方法。 三种方 法相互验证起到日常检测质量的控制作用。 脂肪检验要求 认真细致 , 一旦忽视某个细节 , 都会造成实验失败。